Guanidino hidrochlorido ir guanidino tiocianato poveikis ekstrahuojant nukleino rūgštis

Nukleorūgščių ekstrahavimas reiškia nukleorūgščių atskyrimą nuo mėginių fiziniais ir cheminiais metodais. Aukštos kokybės nukleorūgščių išskyrimas yra pagrindinis žingsnis atliekant molekulinės biologijos tyrimus. Guanidino hidrochloridas ir guanidino tiocianatas gali denatūruoti baltymus ir yra plačiai naudojami ekstrahuojant nukleorūgštis. Šiame darbe bus pristatytos guanidino hidrochlorido ir guanidino tiocianato funkcijos ekstrahuojant nukleorūgštis.

Guanidino hidrochloridas, CAS Nr .: 50-01-1, yra balti kristaliniai milteliai. Guanidino hidrochloridas yra stiprus nukleazės inhibitorius, tačiau jis nėra stiprus denatūrantas. Pagrindinis jo vaidmuo ekstrahuojant nukleorūgštis yra denatūruoti baltymus ir slopinti fermentų aktyvumą. Guanidino hidrochloridas gali greitai sunaikinti ląstelių membraną ir denatūruoti bei nusodinti baltymą, todėl nukleorūgštis gali atsikratyti baltymo įsipainiojimo.

Guanidino tiocianatas, CAS Nr.: 593-84-0, yra balti kristaliniai milteliai. Guanidino tiocianatas yra galingas baltymų denatūrantas, neturintis RNazės ir DNazės aktyvumo. Nukleino rūgščių ekstrahavimo metu guanidino tiocianatas gali greitai sulaužyti ląsteles ar virusus, kad išsiskirtų nukleino rūgštis, slopinti ląstelių išskiriamą nukleazę ir užtikrinti pirminės nukleino rūgšties struktūros vientisumą.

Guanidino hidrochloridas ir guanidino tiocianatas yra įprastos guanidino druskos nukleorūgščių ekstrahavimo lizatuose. Jie gali ne tik suteikti daug druskos aplinką, bet ir inaktyvuoti nukleazę, išlaisvinti nukleorūgštį ir apsaugoti nukleino rūgšties molekules.