Guanidino hidrochloridas - Baltymus perlenkiantis, tirpinantis baltymas

        Baltymų renatūravimo procese pirmiausia reikia ištirpinti inkliuzinio kūno baltymą. Inkliuzinio kūno baltymas reiškia bakterijų ekspresuojamų baltymų agregaciją ląstelėse, kad susidarytų neaktyvios kietosios dalelės, kurios yra amorfinės ir netirpios vandenyje ir tirpsta tik denatūrantuose, tokiuose kaip karbamidas irguanidino hidrochloridas.

Vėliau denatūruojantis agentas lėtai pašalinamas, siekiant atkurti tikslinį baltymą iš denatūruotos visiškai ištemptos būsenos į normalią sulankstytą struktūrą, o reduktorius pašalinamas, kad būtų galima normaliai susidaryti disulfidinėms jungtims. Paprastai renaturavimo procesasguanidino hidrochloridasprasideda 4M ir baigiasi 1,5M. Yra keletas skirtingų metodų:

Skiedimas ir perlankstymas: tiesiogiai įpilkite vandens arba buferio, kad praskiestumėte tirpalą, ir palikite per naktį, kad išsiskirtų baltymų nuosėdos. Trūkumas yra tas, kad labai padidėja tūris, per greitas denatūranto praskiedimo greitis ir jį sunku kontroliuoti; dializė arba ultrafiltravimo perlankstymas: abu denatūrantai Mažos molekulinės medžiagos gali palaipsniui prasiskverbti pro porėtą membraną dializės ar ultrafiltravimo metu, todėl denatūruoto baltymo tirpalo denatūravimo koncentracija palaipsniui mažėja ir galiausiai pašalinama, kad denatūruotas baltymas būtų sulankstytas ir vėl sulankstytas. Privalumas yra tai, kad jis nepadidina garsumo. Denatūranto pašalinimo greitis kontroliuojamas palaipsniui mažinant išorinio permeato koncentraciją, tačiau procesas yra lėtas ir daug laiko reikalaujantis; renatūracija kolonėlėje: renatūracija pasiekiama chromatografijos procese, kuris buvo neseniai sėkmingai ištirtas. Gamyboje naudojamas perlankstymo būdas. Privalumas yra tas, kad chromatografinės fiksacijos adsorbcijos pajėgumas yra palyginti mažas, palyginti su denatūruotu baltymu, o tai gali pagerinti perlankstymo kokybę ir aktyvumo išeigą; tuo pačiu metu jis taip pat gali atskirti tikslinį baltymą ir priemaišų baltymą, kad būtų pasiektas gryninimo tikslas; ir patogu atgauti denatūrantą.

Baltymai yra biologinė makromolekulė, susijusi su gyvenimu, būtina medžiaga normaliai gyvenimo eigai palaikyti, be to, tai yra antrosios kartos gyvenimo paveldėjimo kodas. Įvairūs baltymų tyrimai taip pat labiau domina žmones, o jų struktūros tyrimai taip pat yra labai svarbūs medicinos pažangai. Baltymų denatūravimas arba renaturavimas yra vienas iš pagrindinių gyvybės mokslo tyrimų klausimų. Tarp jų - denatūratoguanidino hidrochloridasgali ne tik denatūruoti baltymą, palengvinti jo struktūros tyrimą, bet ir ištirpdyti inkliuzinio kūno baltymą renatūravimo proceso metu. Suvaidino esminį vaidmenį atliekant tyrimą.